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制备金属铅抗原可以用乙酸铅吗

制备金属铅的抗原,实验材料中的硝酸铅可以用乙酸铅代替吗?

【摘要】:
本发明公开了一种重金属铅人工抗原的制备方法,以2‑S‑(4‑氨基苯)‑1,4,7三氮杂环壬烷‑1,4,7‑三乙酸(p‑NH2‑Bn‑NOTA,简称NOTA)为螯合剂,将铅离子螯合剂复合物与载体蛋白牛血清白蛋白BSA或鸡卵清蛋白OVA偶联,制备人工抗原,该方法在原来传统基础上增加了丙二酸二乙酯处理步骤,提高了偶联效率与抗血清效价。对于不同金属,金属性质不同,它们与相同螯合剂的结合比不同,抗血清效价不同;相同金属,它们与不同螯合剂的结合比不同,抗血清效价不同。重金属铅与螯合剂NOTA与丙二酸二乙酯的结合较为稳定且抗血清效价较高。本发明还公开了NOTA在制备重金属铅人工抗原试剂中的应用。
【主权项】:
1.一种重金属铅人工抗原的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:称取5‑8 mg 2‑S‑(4‑氨基苯)‑1,4,7三氮杂环壬烷‑1,4,7‑三乙酸(p‑NH2‑Bn‑NOTA,简称NOTA),溶解于2 mL 0.01 M、pH7.4 4‑羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES溶液,制得NOTA螯合剂溶液,此溶液为A液;称取124.2 mg硝酸铅溶解于5 mL超纯水中,制得浓度为7.5×10‑2M的硝酸铅溶液,此溶液为B液;将150‑200 μL的B液加入到A液中,室温下避光反应3‑5h,此反应液为C液;向C液中逐滴加入500‑800 μL,20 mM的戊二醛溶液,室温避光反应过夜,此反应液为D液;称取20‑30 mg 牛血清白蛋白BSA或鸡卵清蛋白OVA溶解于3 mL HEPES,室温下磁力搅拌混匀,此反应液为E液;将D液逐滴加入到E液中,室温下避光反应24 h,后加入150‑200 μL丙二酸二乙酯溶液(84.6 mg溶解于2 00μL乙醇中),室温下避光反应1h;反应液先用8 KD的透析袋透析3‑5次,再用30 KD的超滤离心管7000‑9000 rpm离心3‑5次,用5‑10 mL的0.01 M,pH7.4的HEPES溶液复溶,后分装,‑20 ℃低温保存,制得重金属铅人工抗原。

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