在实时荧光定量实验中,同一对引物,A模板是单峰,B模板是双峰,各位大神这是为什么呢,
其中B模板所含目标物质含量较少
1、模板是不确定的,只有第一轮PCR反应的模板是原始模板,从第二次PCR反应开始,上一轮PCR扩增出的新DNA可以作为模板进行PCR反应。
2、PCR反应的量是指数扩增,多少轮反应就是模板的多少次方的关系,原来模板不同,对后续的反应的影响是原来模板间的差异,即原来模板差异为2倍,则最终产物也相差2倍,而这个倍数对整体扩增的30几次方的数量来比,可以忽略不计了,也就是无法区分开
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