双光子以上的激发,激发的是什么光?
在一般的荧光现象中,由于激发光的光子密度低,一个荧光分子只能同时吸收一个光子,再通过辐射跃迁发射一个荧光光子,这就是单光子荧光。对于以激光为光源的荧光激发过程,则可能产生双光子甚至多光子荧光现象,这时所用的激发光源强度高,光子密度满足荧光分子同时吸收两个光子的要求。以一般的激光为激发光源的过程中,光子密度仍然不足以产生双光子吸收现象,通常采用飞秒脉冲激光器,其瞬时功率可以达到兆瓦量级。因此,双光子荧光的波长比激发光的波长短,相当于半激发波长激发产生的效果。
多光子激发扫描系统的局限:
目前,由于多光子技术的发展时间短,技术本身也存在一些局限。
(1)只能对荧光成像;
(2)由于红外和近红外光源的使用,样品可能受到热损伤;
(3)分辨率略有降低;
(4)成本较高。
所以目前,多光子激发以荧光为主。
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