鸡胚中和实验如何开展生物安全保护
做鸡胚中和实验如何开展生物安全保护
鸡胚中和试验
1.通过对鸡胚半数致死量的测定,选择病毒液的稀释度,用灭菌生理盐水将病毒稀释成每0.1ml含有100个LD50。
2.血清处理,对血清56℃水浴加温灭活,并作10倍倍比稀释,1010-1~10-10。
3.将病毒液分别于稀释血清等量混合,于37℃感作1h。
4.对鸡胚分组,分为12组,每组5只鸡胚,实验组10组,正常对照组,以及病毒对照组(100个LD50)。
5.对实验组每个稀释度接种5只鸡胚,每只0.2ml。正常对照组注射0.2ml生理盐水。病毒对照组接种0.2ml含有100个LD50的病毒液。
6.置于37℃孵化箱孵育144h,弃去24h内死亡的鸡胚,此后每6h照蛋一次,及时将死亡鸡胚取出,至144h将鸡胚全部取出,并放置4℃保存。
7.逐日观察每组鸡胚的死亡数,并作记录。
8.按Reed和Muench氏法计算中和指数。
如何开展生物安全保护
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